Звонок бесплатный
Звонок бесплатный

БоТП способствует пролиферации клеток-предшественников мышечной ткани человека и сохранению у них свойств стволовых клеток

Журнал «Публичная научная библиотека» (PLOS). Июнь 2013 г. 7;8(6):e64923. doi: 10.1371/journal.pone.0064923.

Ли Х., Юзас A., Поддар М., Чэнь Ш.В., Томпсон С., Ахани Б., Камминз Дж., Лавазани M., Юар Дж.

Источник данных Отделение ортопедической хирургии, центр исследования стволовых клеток, университет Питтсбурга, Питтсбург, Пенсильвания, США.

Краткий обзор

Клетки-предшественники мышечной ткани человека (hMDPC) представляют собой многообещающую перспективу для использующей клетки упомянутой ткани регенеративной медицины. Однако для получения достаточного для трансплантации количества клеток необходимо их пролонгированное размножение ex vivo с использованием сыворотки крови животных. Поскольку использование сыворотки крови животных сопряжено с риском, требуется разработка стратегии размножения hMDPC вне организма.

Задачей настоящего исследования являлось изучение эффективности применения богатой тромбоцитами плазмы (PRP) для размножения hMDPC вне организма. Посредством модифицированной методики предварительного культивирования и флуоресцентно-активированной клеточной сортировки (ФАКС) нами были изолированы три популяции hMDPC - предварительно культивированные MDPC, клетки эндотелия мышечной ткани и перициты соответственно. Смешанная аллогенная PRP человека была получена в местном банке крови. Был проведен сравнительный анализ воздействия на процесс размножения hMDPC ex-vivo среды с добавлением активированного тромбином препарата, содержащего продукты секреции тромбоцитов PRP, и среды с добавлением эмбриональной бычьей сыворотки (ЭБС), как in vitro, так и in vivo. PRP значительно увеличивала кратковременную и долговременную клеточную пролиферацию, как с добавлением ЭБС, так и без нее. Нейтрализация ТцФР (PDGF) антителами значительно снижала интенсивность митогенного/пролиферативного воздействия PRP на hMDPC. У клеток, размножавшихся под воздействием PRP, наблюдались более стабильная и продолжительная экспрессия маркеров, соотносимых со стволовостью, и снижение экспрессии специфичных для линии маркеров, по сравнению с клетками, размножавшимися под воздействием ЭБС. Способность к остеогенной, хондрогенной и миогенной дифференцировке in vitro у клеток hMDPC, размножавшихся в среде с добавлением PRP, изменена не была. Все популяции hMDPC, размножившиеся в среде с добавлением PRP, сохранили свою способность к восстановлению мышечных волокон in vivo.

Полученные нами данные свидетельствуют о том, что PRP стимулирует пролиферацию и способствует сохранению у hMDPC способности к многопрофильной дифференцировке в ходе размножения ex-vivo посредством поддерживания клеток в недифференцированном состоянии. Кроме того, согласно результатам наблюдений, PDGF является ключевым фактором благоприятного воздействия PRP на пролиферацию hMDPC.